1.原理：

       将外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上，載體通過慢病毒包裝被感染到宿主細胞并整合到宿主染色體中，用載體中所含抗性基因進行篩選。得到可穩定表達目的蛋白，或者穩定表達沉默特定基因的細胞株。

       shRNA細胞株構建原理：短發卡RNA（shRNA）是可以克隆到表達載體并表達短的幹擾RNA（sIrna,19-21個核苷酸的RNA雙鏈）的DNA分子。我們可根據靶标設計短發卡RNA（shRNA）序列并将其克隆島特定載體上。短發夾RNA是設計爲能夠形成發夾結構的非編碼小RNA分子，可通過RNA幹擾來抑制基因的表達。

過表達細胞株構建原理：通過人工構建的方式在目的基因上遊加入調控元件，使基因可以在人爲控制的條件下實現大量轉錄和翻譯，從而實現基因産物的過表達。

       KO細胞株構建原理：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。随着基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較成功的有基因的插入突變和iRNA，它們同樣可以達到基因敲除的目的。

2.技術應用

        需要長期觀察外源基因表達的作用，進行長期藥理學研究、基因治療研究、遺傳調控機制研究或需要進行大規模蛋白合成則需要構建穩轉株。

3.實驗流程：

4.結果展示：

DU145細胞熒光圖                            SW480細胞熒光圖

客戶提供：細胞株（凍存管/培養細胞），目的基因的質粒/菌株，目的蛋白抗體，目的基因的載體信息、細胞培養信息

HYY提供：細胞株兩管凍存管或一瓶複蘇細胞，細胞株構建報告，QPCR鑒定報告，WB鑒定報告